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審計追蹤液相色譜的液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)介紹
點(diǎn)擊次數:2165 更新時(shí)間:2019-01-10
審計追蹤液相色譜的液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)介紹
液質(zhì)聯(lián)用,即審計追蹤液相色譜 -質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),是目前很好的檢測技術(shù),以其快速的分離能力、超高的靈敏度著(zhù)稱(chēng).本文將介紹液質(zhì)聯(lián)用法的原理,優(yōu)點(diǎn),分離方法以及應用,對于想要發(fā)高分文章,希望自己的數據被認可的客戶(hù),可以了解一下。
液質(zhì)聯(lián)用的原理:
液質(zhì)聯(lián)用是以審計追蹤液相色譜為分離系統,質(zhì)譜為檢測系統。樣品經(jīng)過(guò)審計追蹤液相色譜分離后,流動(dòng)相分流進(jìn)入質(zhì)譜儀,在離子源被電離,產(chǎn)生帶有一定電荷、質(zhì)量數不同的離子。質(zhì)譜儀依據不同離子在電磁場(chǎng)中的運動(dòng)行為不同來(lái)檢測各個(gè)離子,根據每一個(gè)離子的質(zhì)荷比(質(zhì)量與電荷數比值)不同,顯示在色譜圖上,后通過(guò)對色譜圖的分析,得到樣品的檢測數據。
液質(zhì)聯(lián)用法對于樣品的要求:
同任何其他分析方法一樣,樣品前處理在LC-MS分析中是重中之重的。對所用樣品,無(wú)論是什么類(lèi)別,都有如下要求:
樣品清潔,盡量不含雜質(zhì),由于蛋白質(zhì)和肽類(lèi)在ESI上有很強的響應,這兩樣化合物尤其要注意;
樣品不宜含有高濃度的難揮發(fā)酸(磷酸,硫酸等)及其鹽,這些會(huì )引起液質(zhì)聯(lián)用儀很強的噪聲;
為了防止堵塞柱子、噴口及毛細管入口,樣品的粘度不要太大。
液質(zhì)聯(lián)用法用于樣品分離的常用方法:
1.固相萃?。⊿PE)
這是應用廣泛的處理樣品的方法,固定相是吸附劑,流動(dòng)相是萃取過(guò)程中的水樣。當固定相與流動(dòng)相接觸時(shí),其中的某些痕量物質(zhì)就保留在固定相中。這時(shí)用少量的選擇性溶劑洗脫,即可達到富集和純化目標物的目的。
分離方法的比較
方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)
液液萃取法儀器設備簡(jiǎn)單,應用廣泛工作量大,溶劑消耗大,污染環(huán)境
蛋白沉淀操作簡(jiǎn)單,儀器設備簡(jiǎn)單檢測靈敏度低,非特異性沉淀
固相萃取回收率高,重現性好。需要建立方法,成本較高
2.阻定性進(jìn)入介質(zhì):
阻定性進(jìn)入介質(zhì)(restricted access media,RAM)有兩層不同的表面,即外層表面與內層表面,外層表面通過(guò)體積排除作用僅允許小分子進(jìn)入內層表面。內層表面通過(guò)傳統的分配作用“捕獲”被分析物。RAM介質(zhì)常用于在大分子共存時(shí)小分子樣品的分離和富集.可有效地除去血液和尿液中的基質(zhì)。
3.灌注固相萃?。?br /> 灌注填料是近些年才出現的一種填料,顆粒上同時(shí)有貫通型的孔以及擴散型的穴。這種填料制成的固相萃取用品或液相柱,可以以每min幾十ml的速度上樣,用于諸如培養基中蛋白質(zhì)和肽類(lèi)的分離、富集和脫鹽,具有不可比擬的優(yōu)勢。
4.超濾:
超濾(ultrafiltration)是一種加壓膜分離技術(shù),小分子溶質(zhì)和溶劑在一定壓力下,穿過(guò)一定孔徑的特制的薄膜,過(guò)濾了大分子物質(zhì),從而達到純化大分子物質(zhì)的目的。具有操作簡(jiǎn)便,成本低廉,條件溫和等眾多優(yōu)勢,但不能用于蛋白溶液。
5.免疫親和萃?。?br /> 免疫親和萃取是基于固相化的配基(抗體)和樣品之間的相互作用的樣品前處理方法,具有分離效率高、專(zhuān)屬性高等優(yōu)點(diǎn)。其原理是分析物(抗原)結合特異性抗體,可以通過(guò)不同于樣品溶液PH或離子強度的緩沖液洗脫而達到分離和純化的目的。 上一篇 淺析EPC氣相色譜法在煤化工領(lǐng)域的應用 下一篇 苯系物檢測氣相色譜的基本原理和優(yōu)缺點(diǎn)
液質(zhì)聯(lián)用,即審計追蹤液相色譜 -質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),是目前很好的檢測技術(shù),以其快速的分離能力、超高的靈敏度著(zhù)稱(chēng).本文將介紹液質(zhì)聯(lián)用法的原理,優(yōu)點(diǎn),分離方法以及應用,對于想要發(fā)高分文章,希望自己的數據被認可的客戶(hù),可以了解一下。
液質(zhì)聯(lián)用的原理:
液質(zhì)聯(lián)用是以審計追蹤液相色譜為分離系統,質(zhì)譜為檢測系統。樣品經(jīng)過(guò)審計追蹤液相色譜分離后,流動(dòng)相分流進(jìn)入質(zhì)譜儀,在離子源被電離,產(chǎn)生帶有一定電荷、質(zhì)量數不同的離子。質(zhì)譜儀依據不同離子在電磁場(chǎng)中的運動(dòng)行為不同來(lái)檢測各個(gè)離子,根據每一個(gè)離子的質(zhì)荷比(質(zhì)量與電荷數比值)不同,顯示在色譜圖上,后通過(guò)對色譜圖的分析,得到樣品的檢測數據。
液質(zhì)聯(lián)用法對于樣品的要求:
同任何其他分析方法一樣,樣品前處理在LC-MS分析中是重中之重的。對所用樣品,無(wú)論是什么類(lèi)別,都有如下要求:
樣品清潔,盡量不含雜質(zhì),由于蛋白質(zhì)和肽類(lèi)在ESI上有很強的響應,這兩樣化合物尤其要注意;
樣品不宜含有高濃度的難揮發(fā)酸(磷酸,硫酸等)及其鹽,這些會(huì )引起液質(zhì)聯(lián)用儀很強的噪聲;
為了防止堵塞柱子、噴口及毛細管入口,樣品的粘度不要太大。
液質(zhì)聯(lián)用法用于樣品分離的常用方法:
1.固相萃?。⊿PE)
這是應用廣泛的處理樣品的方法,固定相是吸附劑,流動(dòng)相是萃取過(guò)程中的水樣。當固定相與流動(dòng)相接觸時(shí),其中的某些痕量物質(zhì)就保留在固定相中。這時(shí)用少量的選擇性溶劑洗脫,即可達到富集和純化目標物的目的。
分離方法的比較
方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)
液液萃取法儀器設備簡(jiǎn)單,應用廣泛工作量大,溶劑消耗大,污染環(huán)境
蛋白沉淀操作簡(jiǎn)單,儀器設備簡(jiǎn)單檢測靈敏度低,非特異性沉淀
固相萃取回收率高,重現性好。需要建立方法,成本較高
2.阻定性進(jìn)入介質(zhì):
阻定性進(jìn)入介質(zhì)(restricted access media,RAM)有兩層不同的表面,即外層表面與內層表面,外層表面通過(guò)體積排除作用僅允許小分子進(jìn)入內層表面。內層表面通過(guò)傳統的分配作用“捕獲”被分析物。RAM介質(zhì)常用于在大分子共存時(shí)小分子樣品的分離和富集.可有效地除去血液和尿液中的基質(zhì)。
3.灌注固相萃?。?br /> 灌注填料是近些年才出現的一種填料,顆粒上同時(shí)有貫通型的孔以及擴散型的穴。這種填料制成的固相萃取用品或液相柱,可以以每min幾十ml的速度上樣,用于諸如培養基中蛋白質(zhì)和肽類(lèi)的分離、富集和脫鹽,具有不可比擬的優(yōu)勢。
4.超濾:
超濾(ultrafiltration)是一種加壓膜分離技術(shù),小分子溶質(zhì)和溶劑在一定壓力下,穿過(guò)一定孔徑的特制的薄膜,過(guò)濾了大分子物質(zhì),從而達到純化大分子物質(zhì)的目的。具有操作簡(jiǎn)便,成本低廉,條件溫和等眾多優(yōu)勢,但不能用于蛋白溶液。
5.免疫親和萃?。?br /> 免疫親和萃取是基于固相化的配基(抗體)和樣品之間的相互作用的樣品前處理方法,具有分離效率高、專(zhuān)屬性高等優(yōu)點(diǎn)。其原理是分析物(抗原)結合特異性抗體,可以通過(guò)不同于樣品溶液PH或離子強度的緩沖液洗脫而達到分離和純化的目的。 上一篇 淺析EPC氣相色譜法在煤化工領(lǐng)域的應用 下一篇 苯系物檢測氣相色譜的基本原理和優(yōu)缺點(diǎn)